Одгледување на вируси во клеточна култура.
Клетките добиени од различни органи и ткива на луѓе, животни, птици или други биолошки објекти, се способни да се размножуваат надвор од телото на вештачки хранливи подлоги во специјални лабораториски контејнери (душеци, шишиња, епрувети итн.) Клеточни култури од ембрионални и малигно дегенерирани ткива, кои имаат поактивна способност во споредба со нормалните клетки на возрасен тело, станаа широко распространети.раст и репродукција.Во зависност од техниката на подготовка, се разликуваат три типа на клеточни култури:
· еднослојни - ќелии способни за прицврстување и размножување на површината на хемиски неутрални стаклени лабораториски стакларија во форма на еднослоен;
Суспензија - клетки кои се размножуваат низ целиот волумен хранлив медиумсо постојано мешање;
Врз основа на бројот на одржливи генерации, клеточните култури се поделени на:
· примарен, способен за репродукција само во првите генерации, т.е. во неколку пасуси по изолација од ткивата;
· континуирано, или стабилно, способно да се размножува во лабораториски услови на неодредено време преку постојано поминување;
· полупресадлив, со ограничен животен век (40 - 50 пасуси).
Културите на животинските и човечките клетки имаат одредени барања за течна (хранлива средина), гасовита (концентрација на гас) и цврста (површина на подлогата) фаза. Кога се подготвуваат хранливи материи за клеточни структури, треба да се решат два тешко компатибилни проблеми. Од една страна, неопходно е да се репродуцира средина колку што е можно слична на средината во која клетките постојат in vivo; од друга страна, за да се создадат контролирани стандардни услови, неопходно е да се знае точниот состав на околината. .
Природни или природни средини:Течностите во шуплината (амнионска или алантоична течност, ембрионски екстракт, екстракти од ткиво, плазма или серум, GLA - лакталбумин хидролизат - производ на ензимска хидролиза на млеко) ни овозможуваат да го решиме само првиот проблем. Во медиумите подготвени од прочистени, строго дефинирани супстанции, природните услови се само делумно репродуцирани. Овие проблеми лесно се решаваат при краткотрајно одгледување, кога главната улога ја играат фактори како што се осмотскиот притисок, рН, концентрацијата на други неоргански јони, капацитетот на пуферот и атмосферскиот состав. Осмотски притисок во ќелија на 37°≈7,6 атм.
Промените на осмотскиот притисок во рамките на +-10% немаат речиси никакво влијание врз состојбата на клетките, а притисокот останува на нормално ниво, што се постигнува со додавање на NaCl, земајќи ги предвид другите неоргански јони и гликозата. Излегува дека ако тргнеме од потребата за стабилен осмотски притисок, полесно е да се промени концентрацијата на протеини отколку на ниска молекуларна тежина, особено неоргански соединенија.
Оптималната pH вредност – 7,2 – 7,4 е контролирана со пуферски систем кој го симулира крвниот пуферски систем (NaHCO3 на слаб фосфатен пуфер).
Потребно за опстанок на клетките ин витро неоргански јони Na, Ca, Mn, Fe, CO2, PO4, SO4. Нивната улога не е целосно разбрана, но тие се неопходни за одржување на осмотскиот притисок, врзувањето на клетките со стаклото и ензимската активност. Затоа, основата на секој хранлив медиум е избалансирана во осмотскиот притисок, pH вредноста итн. солен раствор.
Солените раствори на Ерл и Хенкс најчесто се користат за подготовка на медиум за култура. Овие раствори, како Dulbecco и Vogt-овиот фосфат пуфериран солен раствор, исто така се користат за наводнување и миење на клетките за време на премин на култури, изолација на клеточни линии и други манипулации со клеточни култури.
Солни раствори на Ерл и Хенкс со висок пуферски капацитет од најмалку 3 ml (раствор на сол на Хенкс Ca Mg K Na - фосфор, сулфурни соли хлороводородни киселини, Д-гликоза, фенол црвено;Ерла - посиромашна) + серум, плодова вода, ембрионални екстракти, екстракт од квасец. Опсегот на pH и осмоларност во кој се јавува клеточната пролиферација се тесни и варираат во зависност од типот на клетката. За одржување на pH вредноста, повеќето медиуми користат бикарбонат пуфер: HCO3 = CO2 + OH, ако се ослободи јаглерод диоксид, концентрацијата на OH се зголемува. Растворите може да содржат мали количества бикарбонат пуфер (Хенков раствор) и се наменети за одржување на pH вредноста во цврсто затворени садови. Други (Ерловиот раствор) содржат повеќе бикарбонати и се користат во системи со зголемен парцијален притисок на CO2. Ако културите се одржуваат надвор од инкубатор на CO2, каде што pH е потешко да се одржува, потребни се алтернативни пуферски системи. Добар пуфер е HEPES 4-(2-хидроксиетил)1-пиперазинетансулфонска киселина. Индикаторите се додаваат на хранливите медиуми со цел да се контролира киселоста на медиумот во кое било дадено време. За време на растот, клетките го закиселуваат медиумот, а индикаторот станува жолто-портокалова боја.
Синтетички, стандардни медиуми:медиум 199, медиум Eagle и неговите модификации, медиум RPMI1-1640, тие содржат многу компоненти неопходни за развој на клетките: амино киселини (10 есенцијални, како и цистин и тирозин, многу клетки бараат глутамин), витамини растворливи во вода, особено групата Б , синтеза на коензими АТП, холин и инозитол, кои делуваат како јаглеводородна супстрат. Медиумите се базираат на решенијата на Ерл или Хенкс. Тие се користат како средства за поддршка за примарните клетки и за одгледување на лимфоцити и хематопоетски клетки.
Нормално, одржување специфични функцииќелиите на стандардните медиуми не се репродуцираат (освен ако не се трансформираат). За оптимален раст на клетките, обично се додава 5-20% фетален серум.
Серумот е екстремно сложена мешавина од мали и големи молекули кои можат да го промовираат и инхибираат растот на клетките. Главните функции на серумот вклучуваат: обезбедување на хормонски фактори кои го стимулираат растот на клетките и нивните функции; обезбедување фактори за прицврстување и ширење на клетките; обезбедување транспортни протеини кои носат хормони, минерали, липиди итн. Серумските протеини директно и специфично вклучени во стимулирање на клеточната делба се нарекуваат фактори на раст.
Повеќето фактори на раст се присутни во серумот во концентрации од неколку нанограми на милилитар или помалку. Некои од овие фактори се специфични за клетките во одредена фаза на диференцијација; дејството на другите не е ограничено на кој било тип на клетка. Истиот тип на клетки може да биде стимулиран од различни фактори на раст. На пример, фибробластите се размножуваат како одговор на факторот на раст на фибробластите, факторот на раст на епидермисот, факторот на раст добиен од тромбоцитите и соматомедините. Сите овие супстанции се митогени (стимулира митоза). Друг важен фактор на раст за речиси сите типови на клетки е хормонот инсулин. Од останатите хормони, најчесто се користат глукокортикоидите (хидрокортизон, дексаметазон), стероидите (естрадиол, тестостерон, прогестерон) и тироидните хормони (тријодотиронин). Хормоните го стимулираат или инхибираат растот во зависност од видот на клетките и нивната густина. Глукокортикоидите, на пример, влијаат на клеточната пролиферација со промена на нивната чувствителност на факторите на раст.
За транспорт на нискомолекуларни фактори (витамини, амино киселини, липиди и други), потребни се транспортни протеини. Албуминот ја игра оваа улога. Транспортот на железо го обезбедува трансферинот, а површината на повеќето култивирани клетки содржи рецептори за овој протеин. Факторите на клеточно прицврстување и ширење вклучуваат колаген и фибронектин; хондронектинот (адхезија на хондроцитите) и ламинин (адхезија на епителните клетки) се поспецијализирани.
(Џ.Н. Хенкс)
изотоничен пуферски солен раствор кој се користи во вирусологијата.
Прикажи ја вредноста Солен раствор на Хенксво други речници
Saline Adj.— 1. Корелатив по значење. со именка: сол (1*1,4), поврзана со неа. 2. Поврзани со екстракција и производство на сол, со наслаги и ефектот на солта врз smth.
Објаснувачки речник од Ефремова
Решение- раствор, m. 1. Аголот формиран од раширените сечила на ножиците, нозете на компасот итн. (расклопени). компас. Тесно решение. 2. Дупката формирана кога се отвора бивалвулата........
Објаснувачкиот речник на Ушаков
Солен раствор- физиолошки раствор, солен раствор (специјален). Прид., по значење поврзани со екстракција и производство на сол, со наслаги и ефектот на солта врз нешто. Дамки од сол на кожата. продавница.
Објаснувачкиот речник на Ушаков
Солен раствор- види Сол.
Објаснувачки речник на Кузњецов
Жолчка сол агар— (ZhSA) е средно селективен за стафилококи. Високата содржина на натриум хлорид ги инхибира повеќето бактерии, кои се наоѓаат во асоцијација со стафилокок, и присуството.........
Речник на микробиологија
Изотоничен раствор- раствор кој има ист осмотски притисок како и растворот што се споредува.
Речник на микробиологија
Луголовото решение- боја која содржи 1 g метален јод и 2–5 g калиум јодид на 3°0 ml дестилирана вода. Се користи за диференцијално Грам боење на бактерии, за.........
Речник на микробиологија
Олсвера решение— раствор наменет за зачувување на црвените крвни зрнца. Состав: 24,6 g гликоза, 9,6 g натриум цитрат, 5,04 g натриум хлорид, 1200 ml дестилат. вода. Стерилизирајте со филтрација. За зачувување.........
Речник на микробиологија
Рингеровото решение- се состои од 0,9 g натриум хлорид, 0,042 g калиум хлорид, 0,02 g натриум бикарбонат, 100 ml дестилат. вода. Во микробиологијата се користи како разредувач и конзерванс.
Речник на микробиологија
Солен раствор- изотоничен за секој природен супстрат раствор на соли. Во медицинската пракса, вкл. по микробиологија, под Ф.Р. често се разбира 0,85 -0,9% раствор на натриумхлорид Еден од повеќето.......
Речник на микробиологија
Баланс на вода-сол- односот помеѓу количеството на вода и соли внесени и отстранети од телото.
Големо медицински речник
Режим на вода-сол— диета која ја нормализира потрошувачката на вода и минерални соли според физичката активност, климатските услови итн.
Голем медицински речник
Гајема решение- (G. Hayem, 1841-1933, француски лекар) течност за разредување на црвените крвни зрнца во меланжурите пред да се избројат, што е воден растворживин хлорид (0,25%), натриум сулфат (2,5%) и натриум хлорид (0,5%).
Голем медицински речник
Хипертонично решение- (solutio hypertonica) раствор чиј осмотски притисок е повисок од нормалниот осмотски притисок на крвната плазма; во медицината се користат 3-10% водени раствори на натриум хлорид,......
Голем медицински речник
Хипотонично решение- (solutio hypotonica) раствор чиј осмотски притисок е помал од нормалниот осмотски притисок на крвната плазма.
Голем медицински речник
Кал решение- течност компонентамедицинска кал која содржи соли, органска материјаи гасови.
Голем медицински речник
Тампон раствор- , решение на кое може да се додаде умерена количина силна киселинаили силна база без значителни промени во нејзината pH вредност (киселост или алкалност). Обично.........
Воден раствор- раствор во кој водата служи како средство за растворање. Водата раствора многу поларизирани материи, односно ЈОНСКИ и КОВАЛЕНТНИ соединенија со молекуларни диполи......
Научно-технички енциклопедиски речник
Дијабетес сол бубрег- види Псевдохипоалдостеронизам.
Голем медицински речник
Раствор за дијализа- раствор кој се користи во клиничката пракса за дијализа, вклучително и хемодијализа; во вториот случај, тие содржат основни електролити во концентрација блиска до нивната концентрација во крвната плазма.
Голем медицински речник
Солен раствор на диуреза— (d. salina) зголемена D. со зголемување на концентрацијата на соли во урината.
Голем медицински речник
Заситен раствор-, во хемијата, - РЕШЕНИЕ што содржи такво количество растворено соединение што поголемо количество на дадена температура и притисок нема да се раствори, освен......
Научно-технички енциклопедиски речник
Поларно решение— , РЕШЕНИЕ во кое молекулите на растворувачот (на пример, водата) имаат диполни моменти. Во овој случај се формираат комплекси на растворувачи и растворени материи, што придонесува........
Научно-технички енциклопедиски речник
Решение- во хемијата - течност (ITEL) која содржи друга супстанција (ENNOE). За разлика од мешавините, растворот содржи две или повеќе одделни хемиски соединенијане може да се подели......
Научно-технички енциклопедиски речник
Изоосмотско решение- (изо- + осмоза) види Изотоничен раствор.
Голем медицински речник
Изотоничен раствор- (solutio isotonica; синоним изоосмотски раствор) во медицината, раствор чиј осмотски притисок е еднаков на осмотскиот притисок на крвната плазма (на пример, 0,9% воден раствор на хлорид........
Голем медицински речник
Градежна мешавина— во градежништвото, супстанца која се користи за држење на тули, камења, плочки или бетонски блокови заедно во структура. Современиот малтер се состои од смеса.........
Научно-технички енциклопедиски речник
Луголовото решение- (Ј. Г. А. Лугол, 1786-1851, француски лекар) раствор кој содржи јод, калиум јодид и вода во сооднос 1: 2: 17; се користи во лабораториски истражувања и како лек.
Голем медицински речник
Раствор за маст- (unguentum-solutio) маст направена со растворање на лековити материи во база на маст.
Голем медицински речник
Размена на вода-сол- вид на кислород, вклучувајќи ги процесите на влегување, трансформација во телото и ослободување на вода и минерални соли.
Голем медицински речник
Балансиран раствор на сол (BSS) содржи неоргански соли. Покрај тоа, може да содржи натриум бикарбонат и, во некои случаи, гликоза. Составот на некои од најкористените балансирани раствори на сол е претставен во табела. 9.2. Исто така, доколку е потребно, HEPES пуфер (5-20 mM) може да се додаде на овие раствори, додека еквивалентна количина на NaCl се отстранува за да се одржи осмотскиот притисок. Многу комплетни средини и провајдери на опкружување се базирани на BSS, кој
Некои луѓе продаваат медиум MEM Needle со Хенксови соли или Eagle MEM со Ерлови соли укажуваат на тоа кој состав на BSS бил користен при подготовката на медиумот. Солите на Хенкс се користат кога се одгледуваат клетки во затворени колби во воздушна атмосфера, додека Ерловите соли се користат при висока концентрација на бикарбонат во комбинација со 5% CO2 во гасната фаза.
BSS исто така се користи за разредување на аминокиселински и витамински концентрати при подготовка на медиум за култура, за изотонични миења или препарати и за краткотрајна клеточна инкубација (до 4 часа, обично со додавање на гликоза). Составот на BSS често се модифицира - на пример, со елиминирање на гликозата или фенол црвеното од Хенксовиот BSS или елиминирање на јоните на Ca2+ и Mg2+ од PBS на Dulbecco. PBS без Ca2+ и Mg2+ е познат како PBS A раствор, а ознаката D-PBSA ќе се користи низ оваа книга за да укаже на отсуство на овие двовалентни катјони. Модификацијата секогаш мора да биде наведена кога се купува BSS и во публикации и извештаи.
Изборот на BSS зависи и од парцијалниот притисок на CO2 (види дел 9.2.2 и табели 9.1 и 9.2) и од целите на истражувачот. Ако BSS се користи како раствор за деагрегација на ткиво или клеточен монослоен, Ca2+ и Mg2+ обично се исклучуваат, како на пример во физиолошкиот раствор без калциум на Moscona (CMF) или D-PBSA (види Табела 9.2). Изборот на BSS зависи и од тоа дали растворот ќе се користи за култура на суспензија или за еднослојна (прикачена) клеточна култура. Eagle's S-MEM базиран на солен раствор, модифициран од Spinner, е варијанта на минималниот хранлив медиум на Eagle со намалена содржина на Ca2+ за да се намали клеточната агрегација и клеточното прицврстување (види Табела 9.2).
HBSS, EBSS и PBS како пуфери базирани на фосфат имаат низок пуферски капацитет при физиолошка pH вредност. Пол го предложи Tris-buffered BSS, кој е поефикасен како тампон, но бара адаптација за одредени типови на клетки. Најефективните пуфери во моментов се сметаат за HEPES (10-20 mM) во pH опсег 7,2-7,8 и Tricine во pH опсег 7,4-8,0, но употребата на овие пуфери во голем обем значително ги зголемува трошоците за истражување.
- Имунизација (лат. immunis ослободена, ослободена од нешто; синоним: имунопрофилакса, заштитни вакцини, превентивни вакцини) е специфична превенција од заразни болести на луѓето и животните. Имунопрофилакса на голем број заразни болести со капки во воздухот...
Вести за солен раствор на Хенкс
- Г.В. Павлов, Н.В. Научна публикација Никитина, Екатеринбург, 2003 година Вовед Многу гранки на теоретската и практичната медицина, до еден или друг степен поврзани со функционирањето на системот на егзокрините органи и ткива во нормални и патолошки состојби, достигнаа високи нивоа во последните децении.
- Дописен член РАМС, професор И.И. Балаболкин, доктор на медицински науки Л.С. Намазова, д-р. И.В. Сидоренко, професор И.С. Елкис, д-р. А.В. Тополински, професор А.Л. Верткин Научен центар за детско здравје на Руската академија на медицински науки, Москва ММА именуван по И.М. Сеченов МГМСУ именуван по. НА. Станица за Итна и Итна медицинска помош Семашко
Дискусија на Хенкс за солен раствор
- Ништо не ми е јасно! Јадам „изотоничен“ веќе еден месец - минимум масти, слатки, баланс на протеини и јаглехидрати, а трета недела вежбам секој втор ден. На вагата - како што беше (од 58 до 60 со висина од 1,58 нормостенична градба), на сантиметар - истите волумени, добро, можеби поминаа неколку сантиметри
- натриум хидрохлорид Воден (0,9%) раствор на натриум хлорид. Средство за замена на плазма. Неговото друго име е изотоничен раствор за инјектирање на натриум хлорид Фармакологија. Изотоничен раствор на натриум хлорид го надополнува недостатокот на натриум
